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原果膠含量檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S)

貨號(hào) SH0512 售價(jià)(元) 1620
規(guī)格 100T/48S CAS號(hào)
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貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0512

原果膠含量檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S)

100T/48S

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

果膠是植物細(xì)胞壁主要組成成分之一,分為水溶性果膠和不溶性果膠,即原果膠。因其具有良好的乳化、增稠和凝膠作用,在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領(lǐng)域具有較廣泛的應(yīng)用。

測(cè)定原理:

原果膠在稀酸中水解為可溶性果膠,并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為半乳糖醛酸,產(chǎn)物在強(qiáng)酸中與咔唑縮合生成紫紅色化合物,在530 nm處有特征吸收峰。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0512-100T/48S

Storage

提取液:液體

100ml×2

4℃

提取液:液體

100ml

4℃

標(biāo)準(zhǔn)品:液體

1ml

4℃

試劑一:濃硫酸

自備

--

試劑二:液體

2ml

4℃

試劑三:液體

3ml

4℃避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

天平、研缽、常溫離心機(jī)、水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。

樣品處理:

將組織樣品搗碎,按照樣品質(zhì)量(g)和提取液一體積(ml)1: 20的比列(建議取約0.05g樣品,加入1ml提取液一),置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min,取出冷卻后于5000g、 25℃離心10min,去掉上清,沉淀中再加入1ml提取液一重復(fù)操作一次,離心后去上清,沉淀中加入1ml提取液二,置于90℃恒溫水浴鍋中水解1h,取出冷卻后于8000g25℃離心15min,取上清液待測(cè)。

測(cè)定操作表:

 

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本(μl

 

 

30

30

標(biāo)準(zhǔn)品(μl

 

30

 

 

濃硫酸(μl

180

180

180

180

混勻、90℃水浴10min,取出后冷卻

試劑二(μl

 

 

30

 

試劑三(μl

30

30

 

30

混勻,25℃靜置30min

蒸餾水(μl

90

60

60

60

充分混勻,取200μl置于微量石英比色皿/96孔板中,測(cè)定530nm處吸光值,分別記為A1A2、A3A4△A1=A2-A1,△A2=A4-A3

 

計(jì)算公式

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

原果膠含量(mg /g 鮮重)= (C標(biāo)準(zhǔn)×V標(biāo)) ×△A2÷△A1÷(W÷V樣總) = 0.25×△A2÷△A1÷W

C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)品濃度,0.25mg/ml;V標(biāo):反應(yīng)體系中加入標(biāo)準(zhǔn)品體積,0.02mlV樣總:加入提取液體積,1ml;W:樣本鮮重,g。

b.96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

原果膠含量(mg /g 鮮重)= (C標(biāo)準(zhǔn)×V標(biāo)) ×△A2÷△A1÷(W÷V樣總) =0.25×△A2÷△A1÷W

C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)品濃度,0.25mg/ml;V標(biāo):反應(yīng)體系中加入標(biāo)準(zhǔn)品體積,0.02ml; V樣總:加入提取液體積,1ml; W:樣本鮮重,g。

注意事項(xiàng)

1、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

2、濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性,操作時(shí)需特別注意,90℃加熱取出后冷卻再打開蓋子,以防液體飛濺燒傷。                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               

3、若吸光值超過1,可將樣本提取液進(jìn)行適當(dāng)稀釋再進(jìn)行測(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

4、最低檢出限為10μg/g。

 

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