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土壤堿性木聚糖酶(S-BAX)測(cè)定試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號(hào) SH0397 售價(jià)(元) 540
規(guī)格 50T/24S CAS號(hào)
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貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0397

土壤堿性木聚糖酶(S-BAX)測(cè)定試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,BAX一般分離自最適生長(zhǎng)pH9 -11的微生物。

測(cè)定原理:

BAX在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算BAX活力。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0397-50T/24S

Storage

緩沖液:液體

20ml

4℃

試劑一:液體

5ml

4℃避光

試劑二:液體

25ml

4℃避光

說(shuō)明書

一份

自備儀器和用品:

天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、恒溫水浴鍋,可見分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿。

樣品處理:

新鮮土樣風(fēng)干,過(guò)30-50目篩。

測(cè)定操作表:

 

對(duì)照管

測(cè)定管

土樣(g

0.1

0.1

緩沖液(μl

600

400

試劑一(μl

 

200

混勻,50℃震蕩反應(yīng)30min,立即90℃水浴10min,8000g25℃離心10min,取上清500μl

試劑二(μl

500

500

混勻,90水浴中顯色5min,1ml玻璃比色皿,對(duì)照管調(diào)零,測(cè)定A540。

S-BAX計(jì)算公式:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.8432x - 0.0293R2 = 0.9985

酶活定義:50℃,pH9.0條件下,每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生1μmol 還原糖所需的酶量為一個(gè)酶活單位。

S-BAX活力(μmol/d/g 土樣)=A540+0.0293÷ 2.8432×V反總×103÷ W÷T÷ 150

                        = 67.53×A540+0.0293÷ W

V反總:反應(yīng)總體積,0.6ml;T:反應(yīng)時(shí)間,1/48d10001mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。

注意事項(xiàng):

1. 保證震蕩反應(yīng)30min,使酶與底物充分接觸。

2. 注意90℃水浴防止爆開,以免改變反應(yīng)體系。

 

 

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