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土壤漆酶(Soil Laccase,SL)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

貨號 SH0368 售價(元) 1560
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0368

土壤漆酶(Soil Laccase,SL)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

100T/48S

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。

測定原理:

漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計算得漆酶活性

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0368-100T/48S

Storage

試劑一:液體

40ml

4℃

工作液:粉劑

2

4℃避光

說明書

一份

工作液:粉劑×2瓶,4℃避光保存,臨用前每瓶加10ml試劑一溶解。

自備儀器和用品:

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。

樣品處理:

新鮮土樣風(fēng)干,過30-50目篩。

測定步驟:

1、可見分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到420nm,蒸餾水調(diào)零。

 

對照管

測定管

樣本(g

0.02

0.02

試劑一(μl

250

 

工作液(μl

 

250

37℃震蕩反應(yīng)10min,冰浴5min,10000g4℃離心5min,分別取上清200μl420nm處測定吸光值,記為記為A對照和A測定。△A=A測定-A對照。

酶活性計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

酶活性定義每克土壤每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位(U)。

SL活性(nmol/min /g土樣)= ×V反總÷W÷T= 0.694×△A÷W

εABTS毫摩爾消光系數(shù):36L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.25ml;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,10min

b. 96孔板測定的計算公式如下

酶活性定義每克土壤每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位(U)。

SL活性(nmol/min /g土樣)= ×V反總÷W÷T= 1.388×△A÷W

εABTS毫摩爾消光系數(shù):36L/mmol/cm;d:比色皿光徑,0.5cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.25ml;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,10min

注意事項:

1、工作液需臨用前配制,并且盡快使用,4℃保存一周,若變色則不能使用。

2、測定之前進(jìn)行預(yù)實驗,若吸光值較高,請將樣品用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定,并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

 

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