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FDA水解酶(FDA)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

貨號 SH0352 售價(元) 1440
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0352

FDA水解酶(FDA)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

100T/48S

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機質(zhì)的轉(zhuǎn)化,是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。

測定原理:

FDA是一種無色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在490nm處有強吸收峰,通過檢測490nm處的吸光值變化可計算得FDA水解酶活性。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0352-100T/48S

Storage

標(biāo)準(zhǔn)液液體

4ml

4℃

試劑一:液體

40ml

4℃

試劑二:粉劑

1

-20避光

試劑三:液體

40ml

4

說明書

一份

試劑二:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加4ml試劑三溶解。

自備儀器和用品:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋

樣本處理:

稱取風(fēng)干過30-50目篩土壤約0.1g,備用。

測定操作表:

 

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

對照管

測定管

樣本(g

 

 

0.05

0.05

標(biāo)準(zhǔn)液(μl

 

40

 

 

雙蒸水(μl

40

 

 

 

試劑一(μl

200

200

240

200

試劑二(μl

 

 

 

40

充分混勻,30℃,震蕩1h

試劑三(μl

160

160

160

160

10000g,25℃,離心5min,取200μl上清于微量石英比色皿/96孔板中測定490nm處吸光值A△A1=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,△A2=A測定管-A對照管。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

活性計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

酶活性定義:每克土壤每天產(chǎn)生1μmol熒光素的量為一個酶活力單位。

FDA活性(μmol/d/g=△A2÷△A1×C標(biāo)準(zhǔn)品)×V反總÷W

                    = 0.96×△A2÷△A1÷W

b. 96孔板測定的計算公式如下

酶活性定義:每克土壤每天產(chǎn)生1μmol熒光素的量為一個酶活力單位。

FDA活性(μmol/d/g=△A2÷△A1×C標(biāo)準(zhǔn)品)×V反總÷W

                    = 0.96×△A2÷△A1÷W

C標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度100μmol/L;V反總:反應(yīng)總體積,0.4ml;W:樣本質(zhì)量,g

注意事項:

1、盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品,否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。

2、測定之前進(jìn)行預(yù)實驗,若吸光值較高,請進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定,并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

 

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