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土壤中性蛋白酶檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

貨號 SH0327 售價(元) 1500
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0327

土壤中性蛋白酶(S-NPT)試劑盒(微量法 100T/48S)

100管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機化合物的轉(zhuǎn)化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關。

測定原理:

中性條件下,S-NPT可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm有特征吸收峰。

試劑組成和配置:

產(chǎn)品名稱

SH0327-100T/48S

Storage

試劑一:液體

20ml

4℃

試劑二:粉劑

1

4℃

試劑三:粉劑

1

4℃

試劑:粉劑

1

4℃

試劑五:液體

8ml

4℃

試劑:液體

1.5ml

4℃

試劑:液體

5ml

4℃

說明書

一份

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入6ml蒸餾水充分溶解;用不完的試劑4℃保存;

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入2ml試劑七,沸水浴加熱溶解,然后加入8ml

試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入30ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;

試劑六:液體1.5ml×1支,0.05mg/ml標準酪氨酸溶液,4℃保存。

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水。

樣品處理:

新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至680nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定:

試劑名稱

測定管

對照管

風干土樣(g

0.02

0.02

試劑一(μl

 

150

試劑三(μl

150

 

混勻后,40℃水浴30min,振蕩5-6次,使土樣與反應液充分接觸

試劑二(μl

50

50

混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液,在EP管中加入下列試劑

 

測定管

對照管

標準管

上清液(μl

60

60

 

試劑六(μl

 

 

60

試劑四(μl

280

280

280

試劑五(μl

60

60

60

混勻,40℃水浴20min,8000g 25℃離心10min,取上清液200μl,680nm下讀取各管吸光A

注意事項:

標準管只需測一次。每個測定管設一個對照管。

S-NPT活性計算

單位定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg酪氨酸為一個 S-NPT活力單位。

S-NPT(mg/d/g土樣)=C標準×(A測定管-A對照管)÷A標準管×V反總÷W÷T=24×(A測定管-A對照管)÷A標準管

C標準管:標準管濃度,0.05mg/mlV反總:反應體系總體積,0.4ml;T:反應時間,30min=1/48d; W:樣本質(zhì)量,0.02g。

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