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土壤脲酶（S-UE）檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0313 | 售價(jià)（元） | 936 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0313 |
土壤脲酶（S-UE）檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/48S） |
100管/48樣 |
測(cè)定意義：
S-UE能夠水解尿素，產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。
測(cè)定原理：
利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N。
試劑的組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0313-100T/48S |
Storage |
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試劑一：甲苯 |
2ml(自備） |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
-4℃ |
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試劑三：液體 |
22ml |
4℃ |
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試劑四：A液 |
1支 |
4℃ |
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試劑四：B液 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑五：液體 |
2ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，臨用前加入9ml蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的試劑4℃保存；
試劑四A液：液體×1支，4℃保存；試劑四B液：液體×1瓶，4℃保存；臨用前將A液倒入B液中混合，待用；用不完的試劑4℃保存一周。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過30~50目篩。
測(cè)定步驟：
1 、培養(yǎng)
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測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
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風(fēng)干土樣(g) |
0.05 |
0.05 |
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試劑一（μl） |
20 |
20 |
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振蕩混勻，室溫放置15min |
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試劑二（μl） |
90 |
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蒸餾水（μl） |
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90 |
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試劑三（μl） |
190 |
190 |
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混勻，放入37℃水浴培養(yǎng)24h后，10000g 25℃離心10min，取上清液。 |
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2、將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋10倍（取0.1ml上清液，加入0.9ml蒸餾水）。
3、測(cè)氨量（在微量石英比色皿或96孔板中加入下列試劑）：
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測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
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稀釋后的上清液（μl） |
80 |
80 |
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試劑四（μl） |
15 |
15 |
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試劑五（μl） |
15 |
15 |
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充分混勻，室溫放置20min |
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蒸餾水（μl） |
90 |
90 |
混勻，于578nm處，蒸餾水調(diào)零，讀吸光值A，計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
脲酶活力計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/ml），y為吸光值A。
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個(gè)酶活力單位。
脲酶活力（μg/d/g 土樣）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷W÷T =656×(ΔA -0.0373)
10：稀釋倍數(shù)；T：反應(yīng)時(shí)間，1d； V反總：反應(yīng)體系總體積：0.3ml；W：樣本質(zhì)量，0.05g。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.04575x +0.0373；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/ml），y為吸光值A。
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個(gè)酶活力單位。
脲酶活力（μg/d /g 土樣）＝(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V反總÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373)
10：稀釋倍數(shù)；T：反應(yīng)時(shí)間，1d； V反總：反應(yīng)體系總體積：0.3ml；W：樣本質(zhì)量，0.05g。