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尿素氮(BUN)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/96S)

貨號(hào) SH0142 售價(jià)(元) 132
規(guī)格 100T/96S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0142

尿素氮(BUN)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/96S)

100T/96S

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物,在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。

測(cè)定原理:

樣本中尿素氮在氯化高鐵一磷酸溶液中與二乙酰一肟和硫胺脲共煮,生成一種紅色的二嗪化合物,其顏色的深淺與尿素氮含量成正比,采用二乙酰一肟法測(cè)定尿素氮含量。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0142-100T/96S

Storage

試劑一:液體

6ml

4℃避光

試劑二:液體

60ml

4℃避光

說(shuō)明書(shū)

一份

 

自備儀器和用品:

天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

樣品處理:

組織:按照質(zhì)量(g):蒸餾水體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1ml蒸餾水)加入蒸餾水,勻漿后于25℃,10000g離心10min,取上清待測(cè)。

細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):蒸餾水體積(ml )為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml蒸餾水),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

血清或其它液體:直接檢測(cè)。

測(cè)定操作:

·

空白管

測(cè)定管

樣品(μl

 

20

H2Oμl

20

 

試劑一(μl

50

50   

試劑二(ml

500

500

混勻,沸水浴10min,冷卻后,540nm下測(cè)定吸光值。△A=A測(cè)定-A空白??瞻坠苤灰鲆还?。

尿素氮含量計(jì)算:

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y =2.048x + 0.0229,R2 = 0.9943;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。

1、按照血清(漿)或者細(xì)胞培養(yǎng)液體積計(jì)算

尿素氮含量(mg/ml)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)

2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算

尿素氮含量mg/g鮮重)= (△A-0.0229)÷2.048×V樣總÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W

3、按照蛋白濃度計(jì)算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr

V樣總:加入提取液體積,1 ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mlW:樣本質(zhì)量,g

 

b.96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 1.024x + 0.0229,R2 = 0.9943; x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。

1、按照血清(漿)或者細(xì)胞培養(yǎng)液體積計(jì)算

尿素氮含量(mg/ml)= (△A-0.0229)÷1.024=0.9766×(△A-0.0229)

2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算

尿素氮含量(mg/g鮮重)= (△A-0.0229)÷1.024×V樣總÷W=0.9766×(△A-0.0229)÷W

3、按照蛋白濃度計(jì)算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.9776×(△A-0.0229) ÷Cpr

V樣總:加入提取液體積,1 ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。

 

 

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