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花青素還原酶（ANR）檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/48S)
| 貨號(hào) | SH0067 | 售價(jià)（元） | 3840 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0067 |
花青素還原酶（ANR）檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/48S) |
50管/48樣 |
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
花青素還原酶是黃酮合成途徑中的關(guān)鍵酶，在植物體內(nèi)起非常重要的調(diào)控作用，對(duì)花青素還原酶的調(diào)控機(jī)制研究有利于從基因水平改變植物的品質(zhì)。
測(cè)定原理：
花青素還原酶在NADPH存在的條件下作用于飛燕草色素轉(zhuǎn)變?yōu)楸頉]食子兒茶素和NADP，使反應(yīng)體系在340nm處的吸光值下降，吸光值下降速率反應(yīng)了花青素還原酶的活性。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0067-50T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
50ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
40ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
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試劑三：粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
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試劑四：粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加3ml蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加3ml蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加3ml蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
自備儀器和用品：
天平、研缽、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1ml石英比色皿、蒸餾水。
酶液提取：
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。10000g ，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2. 培養(yǎng)液等液體：直接檢測(cè)。
測(cè)定操作表
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試劑名稱 |
測(cè)定管 |
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試劑一（μl） |
750 |
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試劑二（μl） |
50 |
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酶液（μl） |
100 |
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試劑三（μl） |
50 |
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試劑四（μl） |
50 |
充分混勻，于1ml石英比色皿測(cè)定340處吸光值A1，然后在40℃溫育20min后，再測(cè)定340nm處吸光值A2，△A=A1-A2
酶活性計(jì)算公式:
（1）按照蛋白濃度計(jì)算
酶活性定義：在40℃，pH6.5條件下，每毫克蛋白每分鐘催化1nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR活性（nmol/min/mg prot）= ΔA÷（ε×d）×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T
= 80.39×ΔA÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活性定義：在40℃，pH6.5條件下，每克組織每分鐘催化1nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR活性（nmol/min/g 鮮重）= ΔA÷（ε×d）×V反總÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T
= 80.39×ΔA÷W
（3）按液體體積計(jì)算
酶活性定義：在40℃，pH6.5條件下，每毫升液體每分鐘催化1nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR活性（nmol/min/ml）= ΔA÷（ε×d）×V反總÷V樣÷T
= 80.39×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，1ml；ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1ml；V樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應(yīng)時(shí)間，20min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g