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IP,coIP,CHIP細(xì)胞組織通用裂解液
| 貨號(hào) | WB30326 | 售價(jià)（元） | 350 |
| 規(guī)格 | 100ml | CAS號(hào) |
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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WB30326 |
IP,coIP,CHIP細(xì)胞組織通用裂解液 |
100ml |
本產(chǎn)品包含20mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，0.5% Sodium deoxycholate，以及AEBSF,sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA，Na3VO4，leupeptin等八種抑制劑及抑菌劑。其中AEBSF為PMSF的穩(wěn)定及安全替代品。您無需添加PMSF。其裂解產(chǎn)物適合coIP，IP，CHIP實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品本身可室溫保存，而裂解后的樣品建議低溫保存。
其裂解的樣品可不使用傳統(tǒng)BCA法，而通過文淵閣的抗干擾5分鐘蛋白定量試劑盒，一步操作，5分鐘獲得精準(zhǔn)定量。
產(chǎn)品組分及保存：
細(xì)胞組織通用裂解液：100ml
室溫或低溫保存皆可，一年有效。
使用說明
A,對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS洗一遍。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。冰浴15分鐘使細(xì)胞更充分裂解。
對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞。按照6孔板每孔細(xì)胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。冰浴15分鐘使細(xì)胞更充分裂解。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管，然后再裂解。
2. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
B,對(duì)于組織樣品：
1. 把組織剪切成細(xì)小的碎片。
2. 按照每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
3. 用玻璃勻漿器勻漿（或使用文淵閣開發(fā)的手持式電動(dòng)組織勻漿機(jī)勻漿），直至充分裂解。
4. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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